Institut Pasteur, Paris Communication between DNA polymerases and Replication Protein A within the archaeal replisome.
Martínez-Carranza M, Vialle L, Madru C, Cordier F, Tekpinar AD, Haouz A, Legrand P, Le Meur RA, England P, Dulermo R, Guijarro JI, Henneke G, Sauguet L
Cv
Markel, 32 ans, a effectué son doctorat dans le laboratoire de Pål Stenmark à l'université de Stockholm (Suède), où il a étudié les neurotoxines botuliques et leurs interactions avec les récepteurs neuronaux. Après la soutenance de sa thèse en 2020, il a travaillé comme expert en applications cryo-EM à l'université de Lund (Suède), où il a étudié la régulation de la biosynthèse des désoxyribonucléotides chez les bactéries. Depuis novembre 2021, il est postdoctorant dans le groupe réplication de l'ADN dirigé par Ludovic Sauguet à l'Institut Pasteur, où il s'intéresse à la caractérisation de la machinerie de réplication de l'ADN chez les Archaea avec une approche de biologie structurale intégrative.
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Résumé de l'article
Replication Protein A (RPA) plays a pivotal role in DNA replication by coating and protecting exposed single-stranded DNA, and acting as a molecular hub that recruits additional replication factors. We demonstrate that archaeal RPA hosts a winged-helix domain (WH) that interacts with two key actors of the replisome: the DNA primase (PriSL) and the replicative DNA polymerase (PolD). Using an integrative structural biology approach, combining nuclear magnetic resonance, X-ray crystallography and cryo- electron microscopy, we unveil how RPA interacts with PriSL and PolD through two distinct surfaces of the WH domain: an evolutionarily conserved interface and a novel binding site. Finally, RPA is shown to stimulate the activity of PriSL in a WH-dependent manner. This study provides a molecular understanding of the WH-mediated regulatory activity in central replication factors such as RPA, which regulate genome maintenance in Archaea and Eukaryotes.
